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cas:41994-02-9,Biotinyl Tyramide,生物素-酪氨的應(yīng)用

2025-11-21 [22]

生物素-酪氨(Biotin-Tyramide,CAS號:41994-02-9)是一種結(jié)合生物素(Biotin)與酪氨酰胺(Tyramide)的復(fù)合物,在生物醫(yī)學(xué)研究和診斷領(lǐng)域具有重要應(yīng)用。

一、化學(xué)結(jié)構(gòu)與性質(zhì)

  1. 生物素(Biotin)

    • 又稱維生素H或輔酶R,具有環(huán)狀結(jié)構(gòu)(含咪唑酮環(huán)和戊酸側(cè)鏈),與鏈霉親和素(Streptavidin)或親和素(Avidin)的結(jié)合親和力較高(結(jié)合常數(shù)達101? M?1),是生物標記和信號放大的核心基團。

  2. 酪氨酰胺(Tyramide)

    • 酪氨酸的衍生物,含酚羥基,在過氧化氫(H?O?)和辣根過氧化物酶(HRP)催化下,可生成高度反應(yīng)性的自由基,與鄰近蛋白質(zhì)(如抗原附近的酪氨酸殘基)共價結(jié)合,實現(xiàn)信號放大。

  3. 復(fù)合物特性

    • 分子式:C??H??N?O?S,分子量約363.48。

    • 物理狀態(tài):固體/粉末,溶于水及多數(shù)有機溶劑。

    • 穩(wěn)定性:需低溫(-20℃)、干燥、避光保存,避免反復(fù)凍融。

結(jié)構(gòu)式:

image.png

二、核心應(yīng)用領(lǐng)域

  1. 免疫組織化學(xué)(IHC)與細胞成像

    • 信號放大:通過HRP催化酪氨酰胺生成自由基,標記抗原附近蛋白質(zhì),結(jié)合鏈霉親和素-生物素-酶復(fù)合物顯色,顯著提高低豐度抗原檢測靈敏度。

    • 高靈敏度可視化:與熒光標記的鏈霉親和素結(jié)合,實現(xiàn)細胞內(nèi)特定蛋白質(zhì)的高分辨率成像,為病理學(xué)研究提供工具。

  2. 原位雜交(ISH)

    • 增強基因序列信號強度,提高檢測準確性,適用于熒光或顯色檢測。

  3. 酶活性研究

    • 作為酪氨酸激酶底物,通過磷酸化反應(yīng)檢測酶活性,研究催化機制。

  4. 藥物研發(fā)

    • 靶向給藥:生物素標記藥物與腫瘤細胞表面受體結(jié)合的親和素/鏈霉親和素偶聯(lián),實現(xiàn)精準輸送,降低副作用。

    • PROTAC技術(shù):作為連接子(Linker),構(gòu)建蛋白降解靶向嵌合體,誘導(dǎo)目標蛋白降解。

三、作用機制

  1. 標記過程

    • 特異性抗體與組織抗原結(jié)合 → 加入HRP標記二抗 → 添加生物素-酪氨酰胺 → H?O?和HRP催化酪氨酰胺生成自由基 → 自由基與鄰近蛋白質(zhì)共價結(jié)合 → 鏈霉親和素-生物素-酶復(fù)合物顯色。

  2. 信號放大原理

    • 每個HRP分子可催化多個生物素-酪氨酰胺分子沉積,形成局部高濃度標記,通過鏈霉親和素-生物素系統(tǒng)進一步放大信號,突破傳統(tǒng)酶擴增程序靈敏度限制。

四、使用注意事項

  1. 儲存條件

    • 短期保存:4℃;長期保存:-20℃以下,避光、干燥,避免反復(fù)凍融。

  2. 操作規(guī)范

    • 避免形成灰塵和氣溶膠,接觸前需獲得特別說明;在通風良好環(huán)境中使用。

  3. 安全提示

    • 僅供科研使用,不可用于人體實驗、藥物開發(fā)或商業(yè)用途。

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