cas:134759-22-1,5-FITC-生物素,5-FITC Biotin的應用
2025-11-20
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5-FITC-生物素(5-Fluorescein Isothiocyanate Biotin)是一種結(jié)合了熒光素異硫氰酸酯(FITC)和生物素(Biotin)特性的雙功能分子探針,在生物學研究和實驗中具有廣泛的應用價值。
一、化學結(jié)構與性質(zhì)
化學結(jié)構:5-FITC-生物素由FITC和生物素通過共價鍵連接而成。FITC提供綠色熒光信號,生物素則提供與親和素(Avidin)或鏈霉親和素(Streptavidin)的高親和結(jié)合能力。
物理性質(zhì):
外觀:橙黃色固體。
溶解性:溶于大部分有機溶劑,如DMSO(二甲基亞砜)、DCM(二氯甲烷)等,也溶于水。
穩(wěn)定性:在適當?shù)拇鎯l件下(如-20℃,陰涼、干燥、通風良好的庫房,避光保存),具有較高的穩(wěn)定性。
化學性質(zhì):
熒光特性:FITC部分發(fā)射綠色熒光,激發(fā)波長約為495nm,發(fā)射波長約為519nm,適合多數(shù)熒光檢測儀器平臺。
親和特性:生物素部分與親和素或鏈霉親和素之間存在較高親和力(Kd ≈ 10^-15 M),是自然界中較強的非共價相互作用之一。
結(jié)構式:
二、應用領域
生物分子標記:5-FITC-生物素可用于標記蛋白質(zhì)、抗體、DNA等生物分子,通過熒光顯微鏡、流式細胞術等設備觀察生物分子的分布和動態(tài)變化。
免疫檢測:在ELISA、Western Blot和免疫熒光等實驗中,5-FITC-生物素可作為二級抗體或探針標記物,結(jié)合親和素或鏈霉親和素耦合物進行特異性檢測。
親和純化:通過與親和素包被的固相或載體結(jié)合,利用生物素部分的高親和性進行分離與純化,同時通過FITC提供標記信號。
細胞成像與追蹤:可用于活細胞和固定細胞的熒光標記,通過熒光顯微鏡觀察細胞結(jié)構和功能,以及標記細胞表面分子或膜蛋白進行流式細胞術分析。
分子追蹤:在需要對生物素化分子(如DNA、蛋白、納米粒)進行可視化分析時,5-FITC-生物素能直接提供熒光信號,便于實時追蹤。
三、技術優(yōu)勢
雙功能性:同時具備熒光標記能力和高親和性結(jié)合能力。
高特異性:FITC標記具有低背景、高靈敏度,Biotin-Avidin系統(tǒng)具有較高專一性。
實驗兼容性強:可與多種生物樣品(細胞、組織、蛋白等)兼容。
操作簡便:標記步驟相對簡單,不需要復雜的設備和操作技巧。
四、使用注意事項
存儲條件:應存儲于-20℃,陰涼、干燥、通風良好的庫房,避光保存。取用時一定要保持干燥,避免頻繁解凍和冷凍。
安全操作:在使用過程中,應嚴格遵守相關的安全操作規(guī)程,避免直接接觸皮膚和眼睛。
應用范圍:僅用于科學研究或者工業(yè)應用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或診治。
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