UV-Tracer Biotin NHS Ester 是一種結(jié)合了生物素（Biotin）、N-羥基琥珀酰亞胺酯（NHS Ester）活性基團(tuán)和紫外追蹤基團(tuán)（UV-tracer）的化學(xué)探針，主要用于生物分子的標(biāo)記與追蹤。

一、結(jié)構(gòu)與化學(xué)性質(zhì)

• 結(jié)構(gòu)組成：UV-Tracer Biotin NHS Ester由生物素分子、NHS酯活性基團(tuán)和紫外追蹤基團(tuán)三部分組成。生物素部分可與鏈霉親和素或親和素特異性結(jié)合，實(shí)現(xiàn)信號(hào)放大；NHS酯活性基團(tuán)可與含伯胺基的分子（如蛋白質(zhì)、抗體等）發(fā)生共價(jià)結(jié)合，形成穩(wěn)定的酰胺鍵；紫外追蹤基團(tuán)則賦予其紫外吸收特性，便于在標(biāo)記過(guò)程中進(jìn)行追蹤與檢測(cè)。

• 分子式與分子量：其分子式為C52H76N6O17S，分子量為1089.25。

• 物理性質(zhì)：該化合物通常為淡黃色或白色固體，密度預(yù)測(cè)值為1.30±0.1 g/cm3，pKa預(yù)測(cè)值為13.90±0.40。

• 溶解性：可溶于DMSO、DMF等有機(jī)溶劑，有助于在實(shí)驗(yàn)中的溶解與稀釋。

結(jié)構(gòu)式：

二、應(yīng)用領(lǐng)域

• 蛋白質(zhì)標(biāo)記與追蹤：UV-Tracer Biotin NHS Ester可與蛋白質(zhì)中的賴氨酸殘基或N端氨基發(fā)生反應(yīng)，形成生物素化的蛋白質(zhì)。這種標(biāo)記方法不僅保留了蛋白質(zhì)的生物活性，還通過(guò)生物素-鏈霉親和素系統(tǒng)實(shí)現(xiàn)了信號(hào)的放大，提高了檢測(cè)的靈敏度。同時(shí)，紫外追蹤基團(tuán)的存在使得標(biāo)記過(guò)程可被實(shí)時(shí)追蹤與檢測(cè)，便于實(shí)驗(yàn)操作與結(jié)果分析。

• 免疫分析：在ELISA、Western Blot等免疫分析中，UV-Tracer Biotin NHS Ester標(biāo)記的抗體或抗原可與鏈霉親和素或親和素包被的固相載體結(jié)合，形成穩(wěn)定的復(fù)合物。通過(guò)紫外檢測(cè)或化學(xué)發(fā)光檢測(cè)，可實(shí)現(xiàn)對(duì)目標(biāo)分子的定量或定性分析。

• 親和純化：利用生物素-鏈霉親和素系統(tǒng)的高親和力，UV-Tracer Biotin NHS Ester標(biāo)記的分子可被親和柱特異性吸附，從而實(shí)現(xiàn)目標(biāo)分子的純化與分離。

• 細(xì)胞成像與追蹤：在細(xì)胞成像實(shí)驗(yàn)中，UV-Tracer Biotin NHS Ester標(biāo)記的熒光探針或抗體可特異性地結(jié)合到目標(biāo)細(xì)胞或細(xì)胞器上，通過(guò)熒光顯微鏡或共聚焦顯微鏡觀察細(xì)胞內(nèi)的動(dòng)態(tài)變化。紫外追蹤基團(tuán)的存在則有助于在標(biāo)記過(guò)程中實(shí)時(shí)追蹤探針的分布與定位。

三、使用注意事項(xiàng)

• 反應(yīng)條件：標(biāo)記反應(yīng)通常在pH 8-9的緩沖液中進(jìn)行，此時(shí)NHS酯活性基團(tuán)具有較高的反應(yīng)活性。同時(shí)，可加入少量有機(jī)溶劑（如DMSO）以促進(jìn)化合物的溶解與反應(yīng)。

• 反應(yīng)時(shí)間與溫度：反應(yīng)時(shí)間與溫度需根據(jù)具體實(shí)驗(yàn)條件進(jìn)行優(yōu)化。一般來(lái)說(shuō)，反應(yīng)時(shí)間過(guò)長(zhǎng)或溫度過(guò)高可能導(dǎo)致非特異性結(jié)合或蛋白質(zhì)變性等問題。

• 儲(chǔ)存條件：UV-Tracer Biotin NHS Ester應(yīng)儲(chǔ)存于-20℃以下，避免光照與潮濕環(huán)境，以保持其化學(xué)穩(wěn)定性與活性。

• 安全性：在使用過(guò)程中需佩戴適當(dāng)?shù)姆雷o(hù)裝備（如手套、護(hù)目鏡等），避免直接接觸皮膚與眼睛。同時(shí)，廢棄物需按照實(shí)驗(yàn)室安全規(guī)范進(jìn)行處理。

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