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cas:1032732-74-3,Biotin-4-fluorescein,生物素-4-熒光素的概述

2025-11-19 [50]

Biotin-4-fluorescein(生物素-4-熒光素)是一種結(jié)合生物素與熒光素分子的熒光標(biāo)記化合物,在生物學(xué)和醫(yī)學(xué)研究中具有廣泛應(yīng)用。

一、基本信息

  • CAS號(hào):1032732-74-3

  • 分子式:C??H??N?O?S

  • 分子量:644.694 g/mol

  • 外觀:橙黃色固體

  • 溶解性:可溶于水和大多數(shù)有機(jī)溶劑,如DMSO、PBS等

  • 穩(wěn)定性:在避光和低溫條件下儲(chǔ)存時(shí)較為穩(wěn)定,需避免反復(fù)凍融

結(jié)構(gòu)式:
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二、結(jié)構(gòu)與功能

  • 生物素部分:具有與親和素(如鏈霉親和素)高親和力結(jié)合的特性,確保了檢測(cè)的準(zhǔn)確性和靈敏度。

  • 熒光素部分:提供熒光信號(hào),激發(fā)波長(zhǎng)約為494 nm,發(fā)射波長(zhǎng)約為521 nm(也有說法為518 nm),適用于熒光顯微鏡、流式細(xì)胞術(shù)或ELISA等檢測(cè)技術(shù)。

  • 連接臂:通常為4個(gè)碳原子的間隔臂,可減少空間位阻,提高標(biāo)記效率。

三、物理化學(xué)性質(zhì)

  • 密度:1.6±0.1 g/cm3(也有預(yù)測(cè)值為1.55±0.1 g/cm3)

  • 沸點(diǎn):1038.0±65.0 °C(在760 mmHg條件下,為預(yù)測(cè)值)

  • pH影響:熒光特性受pH影響,在堿性條件下熒光較強(qiáng),熒光強(qiáng)度在pH 8-9時(shí)較高,需優(yōu)化緩沖液條件。

  • 光穩(wěn)定性:熒光素易光漂白,操作時(shí)需避光并減少曝光時(shí)間。

四、應(yīng)用領(lǐng)域

  1. 生物分子標(biāo)記

    • 標(biāo)記蛋白質(zhì)、核酸等生物分子,簡(jiǎn)化實(shí)驗(yàn)步驟。

    • 標(biāo)記抗體或核酸探針,用于細(xì)胞或組織成像(免疫熒光染色)。

  2. 熒光檢測(cè)

    • 適用于熒光顯微鏡、流式細(xì)胞術(shù)等檢測(cè)技術(shù)。

    • 標(biāo)記細(xì)胞表面生物素化抗體,結(jié)合熒光素信號(hào)分析細(xì)胞亞群。

  3. 免疫分析

    • 結(jié)合到抗體上,用于ELISA、Western blot等免疫檢測(cè)方法,提升檢測(cè)靈敏度和特異性。

    • 通過生物素-親和素系統(tǒng)放大信號(hào),提高檢測(cè)靈敏度。

  4. 定量分析

    • 用于準(zhǔn)確定量生物樣品中親和素與鏈霉親和素的濃度。

    • 評(píng)估生物素結(jié)合位點(diǎn)或確定親和素/鏈霉親和素的濃度。

五、儲(chǔ)存與使用注意事項(xiàng)

  • 儲(chǔ)存條件:建議室溫避光保存,或根據(jù)具體產(chǎn)品要求在-20°C下儲(chǔ)存。

  • 使用注意事項(xiàng)

    • 操作時(shí)需避光,減少熒光素的曝光時(shí)間,以防止光漂白。

    • 需優(yōu)化緩沖液條件,以確保熒光強(qiáng)度在最佳范圍內(nèi)。

    • 僅用于科研,不能用于人體實(shí)驗(yàn)。

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