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cas:139554-72-6,Biotin-Mal,生物素修飾馬來酰亞胺的相關(guān)描述

2025-11-17 [61]

生物素修飾馬來酰亞胺是一類結(jié)合了生物素高親和力與馬來酰亞胺巰基反應(yīng)活性的化學(xué)試劑,在生物分子標(biāo)記、蛋白質(zhì)功能化及靶向遞送系統(tǒng)構(gòu)建中應(yīng)用廣泛。

一、基本特性

  • 生物素(Biotin):一種小分子維生素,能與親和素(Avidin)或鏈霉親和素(Streptavidin)形成極穩(wěn)定的復(fù)合物,解離常數(shù)Kd≈10^-15M,為分子提供靶向定位能力。

  • 馬來酰亞胺(Maleimide):含雙鍵,可與含巰基(-SH)的分子(如半胱氨酸殘基)發(fā)生特異性Michael加成反應(yīng),形成穩(wěn)定的硫醚鍵。反應(yīng)條件溫和(pH 6.5-7.5),避免使用含巰基的緩沖液(如Tris),推薦使用PBS或HEPES。

二、功能優(yōu)勢(shì)

  1. 定點(diǎn)修飾:通過馬來酰亞胺與蛋白質(zhì)中半胱氨酸的巰基反應(yīng),實(shí)現(xiàn)特異性標(biāo)記,保留蛋白質(zhì)活性。

  2. 熒光標(biāo)記:結(jié)合熒光染料(如FITC)構(gòu)建熒光標(biāo)記的生物分子,用于細(xì)胞成像、流式細(xì)胞術(shù)等。

  3. 蛋白質(zhì)純化:標(biāo)記后利用生物素-親和素系統(tǒng)分離目標(biāo)蛋白,適用于Western blot、ELISA等檢測(cè)。

  4. 修飾含巰基的DNA或RNA探針:結(jié)合生物素-親和素系統(tǒng)進(jìn)行信號(hào)放大,提高檢測(cè)靈敏度。

  5. 抗體-藥物偶聯(lián)物(ADC):通過馬來酰亞胺將藥物連接至抗體,實(shí)現(xiàn)靶向遞送。

  6. 納米顆粒表面修飾:修飾納米顆粒表面巰基,引入生物素功能,拓展其在生物成像、傳感等領(lǐng)域的應(yīng)用。

三、常見衍生試劑

  1. Biotin-PEG-MAL:通過聚乙二醇(PEG)連接生物素與馬來酰亞胺,增加水溶性、減少非特異性結(jié)合,并降低免疫原性。PEG鏈提供柔性間隔臂,提高分子水溶性與生物相容性,同時(shí)降低非特異性吸附,增強(qiáng)表面覆蓋性。

  2. UV-Tracer Biotin-CONH-MAL:嵌入二苯甲酮片段,可通過紫外光(365 nm)激發(fā)熒光,實(shí)時(shí)驗(yàn)證標(biāo)記效率。

四、應(yīng)用領(lǐng)域

  1. 生物醫(yī)學(xué)研究:用于蛋白質(zhì)、抗體、核酸等生物分子的標(biāo)記和純化,以及生物傳感器的構(gòu)建和檢測(cè)。

  2. 藥物傳遞系統(tǒng):作為藥物傳遞系統(tǒng)的組成部分,通過生物素與特定受體的結(jié)合,實(shí)現(xiàn)藥物的靶向輸送和控釋。

  3. 生物材料表面修飾:用于生物材料表面的修飾,改善材料的生物相容性和功能特性。

五、使用注意事項(xiàng)

  1. 保存條件:固體粉末需避光、干燥條件下-20℃保存,避免反復(fù)凍融;溶液建議現(xiàn)配現(xiàn)用,未用完部分分裝后-20℃避光冷凍。

  2. 緩沖液選擇:使用PBS(pH 7.4)或HEPES,避免含巰基的緩沖液(如Tris)。

  3. 淬滅未反應(yīng)基團(tuán):反應(yīng)后加入過量β-巰基乙醇或半胱氨酸。

  4. 安全防護(hù):操作時(shí)佩戴手套與護(hù)目鏡,避免直接接觸皮膚或眼睛。

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