Sulfo-NHS-LC-Desthiobiotin 是一種重要的生物素衍生物,在生物偶聯(lián)和親和純化等領(lǐng)域應(yīng)用廣泛。以下是關(guān)于它的詳細(xì)介紹:
基本信息
結(jié)構(gòu)式:

化學(xué)結(jié)構(gòu):其結(jié)構(gòu)中含有磺?;⊿ulfo-)、N - 羥基琥珀酰亞胺酯(NHS-)和脫硫生物素(Desthiobiotin)部分。磺酰基使其具有良好的水溶性,NHS 酯可與氨基反應(yīng),脫硫生物素則能與鏈霉親和素等親和素特異性結(jié)合。
理化性質(zhì):通常為白色固體,密度約為 1.41g/cm3,酸度系數(shù)(pKa)約為 - 0.04,可溶于大部分有機(jī)溶劑,如 DCM、DMF、DMSO 等,在水中也有很好的溶解性。
作用機(jī)制:Sulfo-NHS-LC-Desthiobiotin 中的 NHS 酯基團(tuán)能與生物分子(如蛋白質(zhì)、抗體、肽等)表面的氨基發(fā)生反應(yīng),形成穩(wěn)定的酰胺鍵,從而將脫硫生物素標(biāo)記到這些分子上。標(biāo)記后的分子可利用脫硫生物素與鏈霉親和素的高親和力結(jié)合特性,進(jìn)行后續(xù)的分離、純化和檢測(cè)。
主要應(yīng)用
蛋白質(zhì)標(biāo)記與純化:通過與蛋白質(zhì)的伯胺基團(tuán)共價(jià)結(jié)合,標(biāo)記后的蛋白質(zhì)可通過鏈霉親和素樹脂捕獲,再利用生物素競(jìng)爭(zhēng)性洗脫,溫和地將蛋白質(zhì)從樹脂上分離下來(lái),避免 harsh 條件損傷蛋白。
細(xì)胞表面標(biāo)記:用于標(biāo)記細(xì)胞膜蛋白時(shí),長(zhǎng)鏈間隔臂(LC)可減少空間阻礙,增強(qiáng)標(biāo)記效率,適用于活細(xì)胞研究,后續(xù)可裂解 Desthiobiotin - 鏈霉親和素相互作用進(jìn)行分離。
相互作用研究:在 pull-down 實(shí)驗(yàn)中,將其偶聯(lián)到誘餌蛋白上,可捕獲與之結(jié)合的蛋白伴侶,用低 pH 或生物素溶液洗脫,能保留蛋白的天然構(gòu)象,便于研究蛋白質(zhì)之間的相互作用。
使用注意事項(xiàng):應(yīng)密封避光,儲(chǔ)存于 - 20℃以下、陰涼干燥通風(fēng)處,避免頻繁解凍,現(xiàn)配現(xiàn)用。同時(shí),要避免與含胺試劑(如 Tris、NaN?)等一起使用,以免干擾反應(yīng),并注意優(yōu)化標(biāo)記比例,減少多標(biāo)記導(dǎo)致的蛋白聚集。
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溫馨提示:僅用于科研,不能用于人體!
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