Biotin-HPDP（生物素-二硫吡啶）是一種巰基反應(yīng)性的生物素化試劑，以下是對其的詳細(xì)介紹：

一、基本信息

• 中文名稱：生物素-二硫吡啶

• 英文名稱：Biotin-HPDP

• CAS號：129179-83-5

• 分子式：C24H37N5O3S3

• 分子量：539.78

• 外觀：固體

• 純度：≥95%

• 溶解性：水不溶性，需溶于二甲基亞砜（DMSO）或二甲基甲酰胺（DMF）等有機(jī)溶劑后，再稀釋于水性緩沖液中使用。

結(jié)構(gòu)式：

二、化學(xué)結(jié)構(gòu)與特性

• 結(jié)構(gòu)組成：由雙環(huán)生物素環(huán)結(jié)構(gòu)、附著在生物素戊酸側(cè)鏈上的1,6-二氨基己烷，以及側(cè)鏈末端的巰基反應(yīng)性基團(tuán)（吡啶基二硫化物）共同組成。

• 反應(yīng)活性：末端的吡啶基二硫化物能夠與蛋白或其他分子上的游離巰基（-SH）反應(yīng)，形成穩(wěn)定的二硫鍵，并釋放吡啶-2-硫酮。

• 可逆性：形成的二硫鍵可被還原劑（如二硫蘇糖醇，DTT）裂解，釋放原始未修飾的生物分子，適用于需要回收原始分子的實驗。

• 長側(cè)鏈優(yōu)勢：長側(cè)鏈設(shè)計使生物素標(biāo)記的分子能夠更好地與親和素（avidin）或鏈霉親和素（streptavidin）探針結(jié)合，提高檢測靈敏度。

三、操作注意事項

1. 溶解與儲存：

• 需溶于DMSO或DMF等有機(jī)溶劑后，再稀釋于水性緩沖液中使用。避免頻繁解凍，建議分裝后-20℃以下冰凍保存。

• 溶解時可用37℃加熱試管并在超聲波水浴中震動片刻，以促進(jìn)溶解。

2. 反應(yīng)條件：

• 在pH 6.5至7.5的緩沖液（如PBS）中反應(yīng)效果較佳。避免使用含硫醇或二硫化物還原劑的緩沖液，以免干擾反應(yīng)。

• 反應(yīng)溫度通常為室溫或25℃，反應(yīng)時間根據(jù)實驗需求調(diào)整（如90分鐘至數(shù)小時）。

3. 未結(jié)合試劑的去除：

• 反應(yīng)后需通過透析、超濾或柱層析等方法去除未結(jié)合的Biotin-HPDP，避免干擾后續(xù)實驗。

4. 安全防護(hù)：

• 操作時需佩戴手套和護(hù)目鏡，避免直接接觸皮膚或眼睛。廢棄物需按實驗室安全規(guī)范處理。

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