生物素-四聚乙二醇-二硫鍵-炔基（Biotin-PEG4-SS-Alkyne） 是一種多功能化學(xué)交聯(lián)劑，結(jié)合了生物素、四聚乙二醇（PEG4）、二硫鍵和炔基的功能基團，廣泛應(yīng)用于生物化學(xué)和分子生物學(xué)領(lǐng)域。

一、化學(xué)結(jié)構(gòu)與組成

• 生物素（Biotin）：一種小分子維生素（維生素B7或維生素H），能夠與鏈霉親和素或抗生物素蛋白高度特異性地結(jié)合，常用于生物分子標記和檢測。

• 四聚乙二醇（PEG4）：一種親水性聚合物鏈，由四個乙二醇單元組成。它能夠增加化合物的水溶性和生物相容性，降低免疫原性，延長在體內(nèi)的半衰期，并減少非特異性結(jié)合。

• 二硫鍵（-S-S-）：一種可還原的化學(xué)鍵，能夠在還原條件下（如細胞內(nèi)谷胱甘肽存在時）斷裂，生成兩個巰基（-SH）。這種特性使得二硫鍵在藥物遞送和靶向釋放系統(tǒng)中非常有用。

• 炔基（-C≡C-）：一種不飽和烴基團，具有高度的反應(yīng)活性。它能夠與疊氮化物（-N?）發(fā)生銅催化的疊氮-炔環(huán)加成反應(yīng)（CuAAC），這種反應(yīng)具有高選擇性和高效性，常用于生物分子的標記和偶聯(lián)。

結(jié)構(gòu)式：

二、物理化學(xué)性質(zhì)

• 外觀：通常為淺黃色或白色固體/粉末。

• 分子式：C??H??N?O?S?。

• 分子量：691.92 g/mol。

• 溶解性：易溶于水、二甲基亞砜（DMSO）、二氯甲烷（DCM）等有機溶劑。

• 穩(wěn)定性：需在-20℃下避光保存，避免反復(fù)凍融以維持活性。

三、功能與應(yīng)用

1. 蛋白質(zhì)標記：通過生物素與鏈霉親和素的結(jié)合，可以將該化合物用于蛋白質(zhì)的標記和檢測，實現(xiàn)對目標分子的快速、高效的檢測和定位。

2. 藥物遞送：二硫鍵的特性使得該化合物能夠在還原環(huán)境中（如細胞內(nèi)）釋放藥物，用于靶向藥物遞送系統(tǒng)。

3. 生物偶聯(lián)：炔基與疊氮化物的點擊化學(xué)反應(yīng)可用于生物分子的偶聯(lián)，如抗體-藥物偶聯(lián)物（ADC）的制備。

4. 生物傳感器：利用生物素與親和素的高特異性結(jié)合，以及炔基的反應(yīng)活性，可以構(gòu)建高靈敏度的生物傳感器。

5. 動態(tài)材料：通過二硫鍵的可逆斷裂和形成，可以設(shè)計具有刺激響應(yīng)性的動態(tài)材料。

四、制備與純化

• 制備：通常涉及多個步驟，包括生物素的活化、PEG4的引入、二硫鍵的形成以及炔基的修飾。這些步驟需要在嚴格的反應(yīng)條件下進行，以確保產(chǎn)物的純度和活性。

• 純化：通過透析、超濾或柱層析等方法去除未反應(yīng)的原料和副產(chǎn)物，得到高純度的生物素-四聚乙二醇-二硫鍵-炔基。

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