cas：66640-86-6，Biotin hydrazide HCl，生物素酰肼的介紹
2025-11-02
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Biotin hydrazide HCl（生物素酰肼鹽酸鹽）是一種重要的生物標(biāo)記試劑，其核心結(jié)構(gòu)由生物素基團、酰肼基團（-NH-NH?）和鹽酸鹽（HCl）組成，具有特殊的理化性質(zhì)和廣泛的應(yīng)用場景。
一、理化性質(zhì)
外觀與狀態(tài)：亮黃色或白色固體粉末，純度通常≥95%。
分子式與分子量：分子式為C??H??ClN?O?S，分子量約為294.80 g/mol。
溶解性：
溶于大部分有機溶劑（如DMSO，溶解度≤20 mg/mL）。
溶于水，鹽酸鹽形式顯著提高了水溶性，便于在水相緩沖液中反應(yīng)。
熔點與沸點：熔點為245-247℃，沸點預(yù)測值為633.1±40.0℃（760 mmHg）。
穩(wěn)定性：
鹽酸鹽形式更穩(wěn)定，便于長期儲存，避免游離酰肼的氧化變質(zhì)。
需避光保存，防止光照引起的分解。
結(jié)構(gòu)式：
二、核心功能
酰肼基團的反應(yīng)特異性：
酰肼基團（-NH-NH?）可與醛基（-CHO）或酮基（-CO-）在弱酸性條件（pH 4.0-6.0）下發(fā)生縮合反應(yīng)，生成穩(wěn)定的腙鍵（-C=N-NH-）。
這種反應(yīng)對醛/酮基具有高度特異性，不與氨基、羧基等其他基團反應(yīng)，可實現(xiàn)精準(zhǔn)標(biāo)記。
鹽酸鹽形式的優(yōu)勢：
顯著提高生物素酰肼的水溶性，使其能在水相緩沖液中溶解并反應(yīng)，無需添加有機溶劑。
形式更穩(wěn)定，便于長期儲存。
生物素的高親和性：
偶聯(lián)后可通過親和素/鏈霉親和素系統(tǒng)高效富集目標(biāo)分子，富集效率可達90%以上。
適用于后續(xù)的檢測、分離或純化。
三、應(yīng)用場景
糖蛋白標(biāo)記與純化：
通過高碘酸氧化糖蛋白的糖鏈生成醛基，再與Biotin hydrazide HCl偶聯(lián)，實現(xiàn)糖蛋白的特異性生物素化。
標(biāo)記后的糖蛋白可通過鏈霉親和素包被的磁珠或瓊脂糖珠進行純化，獲得高純度糖蛋白，用于糖鏈結(jié)構(gòu)分析或功能研究。
核酸標(biāo)記：
可與醛基修飾的DNA/RNA反應(yīng)，制備生物素化核酸探針。
用于Southern blot、Northern blot等雜交實驗，提高檢測靈敏度。
蛋白質(zhì)碳基化檢測：
作為探針用于檢測蛋白質(zhì)碳基化，這是一種由活性氧或脂質(zhì)氧化產(chǎn)物引起的不可逆翻譯后修飾。
在pH 5.5條件下，Biotin hydrazide HCl可專一性地衍生化碳基基團，便于測量生物樣品中的碳基化蛋白質(zhì)。
細胞表面標(biāo)記：
用于生物素化并分離細胞表面糖蛋白，有助于研究細胞表面分子的功能和相互作用。
四、使用注意事項
安全防護：
操作時佩戴手套、護目鏡及實驗服，避免直接接觸或吸入粉末。
避免形成粉塵和氣溶膠，使用非火花工具，防止靜電放電引起的火災(zāi)。
廢棄物按化學(xué)危險品處理，不可隨意丟棄。
儲存條件：
短期保存：2-8℃，避光。
長期保存：建議冷藏，保持容器密封，防止受潮和光照。
反應(yīng)優(yōu)化：
確保目標(biāo)分子含醛基或酮基，或通過氧化處理生成醛基。
控制反應(yīng)pH在4.0-6.0范圍內(nèi)，以獲得最佳標(biāo)記效率。
反應(yīng)后需通過透析、柱層析等方法去除未結(jié)合試劑。
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